名稱(日文拼音)聲優"對哥哥的稱呼(日文拼音)-第一人稱"
可憐（かれん） CV：桑谷夏子 “お兄ちゃん（おにいちゃん）―可憐”
清純派的妹妹女主角。家教很好、而且只對哥哥用敬語。擅長鋼琴。動畫版設定成歸國女子。很能照顧小孩的人、但在哥哥面前又有點撒嬌的感覺。經常出現在各媒體的封面上、乎合本作女主角的設定。9月23日出生。
花穂（かほ） CV：望月久代 “お兄ちゃま（おにいちゃま）―花穂”
經常跌倒、純粹的ドジっ娘妹。即使如此為了應援哥哥、經常在應援部練習、是個堅強的女子。喜歡種花。很注意自己的體重、試過多次減肥但因無法戰勝食欲而告終。有次終於可憐的副女主廷地位。1月7日出生。
衛（まもる） CV：小林由美子 “あにぃ―ボク”
喜歡運動、擁有健康的魅力的妹妹。第一人稱是「ボク」。喜歡帶著滑雪板或流冰鞋、這都反映在服飾上。不想被哥哥當女生對待。任何運動都能做到、就只有球技之類不怎樣。立位體前屈 24cm, 背筋力 107kg, 握力 右/32kg 左/30kg, 垂直跳 53cm, 反復横跳 48回/20秒, 伏臥上身66cm。10月18日出生。
咲耶（さくや） CV：堀江由衣 “お兄様（おにいさま）―私（わたし）”
為引起哥哥注意而表現的コケティッシュ、小悪魔系的妹妹。倔強、很喜歡氣弄最她喜歡的哥哥。喜歡笑話、喜歡幫哥哥設計服裝。當哥哥跟其他女生關係好時、立即像小孩似地吃醋。在集合12人同一世界觀的遊戲版・動畫版担當年紀最大的角色。12月20日出生。
雛子（ひなこ） CV：千葉千恵巳 “おにいたま―ヒナ”
說話的方法很可愛、小孩模式全開的妹妹。小鴨娃娃ピヨちゃん昆她的寶物、喜歡跟媽媽在一起。12人中年紀最小。特徵是會「くしし」的笑。8月15日出生。
鞠絵（まりえ） CV：柚木涼香 “兄上様（あにうえさま）―わたくし”
在遙遠的高原療養院過著入院生活的妹妹。喜歡讀書、性格成熟。在療養院中是個像姐姐一樣的角色。在哥哥沒來探病時、跟寵物大型犬・ミカエル一起玩耍。4月4日出生。
白雪（しらゆき） CV：横手久美子 “にいさま―姫”
喜歡煮食的妹妹。自稱自己為公主、有「～ですの」的獨特口癖。在原作中是個喜歡做糕點的普通可愛妹妹、遊戲版・動畫版中成為制做ゲテモノ的角色。連載當初的設定是、稱呼哥哥為“兄あに（あにあに）”而已髮型也有多少不同。這是她的粉絲間的禁忌（而且、稱呼哥哥為“兄あに”的白雪則稱作白雪α的場合）。2月11日出生。
鈴凛（りんりん） CV：神崎ちろ “アニキ―私（わたし）”
擁有成為發明家才能的理系妹妹。喜歡制做機械被認為是受爺爺的影響。製造了跟自己等身大的機械人「機械鈴凛」、而且重複改良。其他還有「恐怖的崇拜者追蹤機械・シザーマン」之類的獨特發明品。有點少根筋的性格、研究資金困難時會若無其事地問哥哥拿零用錢。7月9日出生。
千影（ちかげ） CV：川澄綾子 “兄くん（あにくん）―私（わたし）”
像魔女一樣、擁有妖艷魅力的妹妹。沈默寡言、經常一個人在房裡用塔羅牌占卜。收集神秘的文献進行奇怪的薬草調合、雖然是妹妹卻完全不知道在想什麼。原作中設定是前世就連繫的兄妹轉生、遊戲版的設定則沒什麼。生日是尤太暦7月10日前後、原作和Re Pure的金色果實的話和贖罪日相同、令人相信應該有什麼關係。3月6日出生。
春歌（はるか） CV：かかずゆみ “兄君さま（あにぎみさま）―ワタクシ”
讓人誤解的和風妹妹。為了做哥哥的護衛在身邊照顧他、從德國遠道而來。為成為獨當一面的大和撫子而學習茶道和薙刀之類各種的傳統文化、技能上任何事都比哥哥強。非常地穩重、相反、也有暴走＋天然傻這種角色的側面。臉紅時會說出「ポッ♥」「ポポポ♥」之類的擬聲詞。在系列後期出現制服姿和水着姿等成為人氣急昇的角色。5月16日出生。
四葉（よつば） CV：半場友恵 “兄チャマ（あにちゃま）―四葉”
知道哥哥生活在日本、而從英國遠道而來的妹妹。自稱是名偵探、視哥哥為疑犯什麼都要「check it」。口癖是「check itデスぅー!!」（「です」「ます」一家要用片假標記）。在周圍是個麻煩製造者。有無盡開朗性格、而且開朗的有點脫線。遊戲版破壞派對而被咲耶責罵後、變的好像有點害怕咲耶的樣子。動畫版跟鈴凛很合的來、經常一起行動。6月21日出生。
亞里亞（ありあ） CV：水樹奈々 “兄や（にいや）―亞里亞”
像大小姐一樣無知的妹妹。擁有獨特的悠閒速度、而且有點愛哭。法國出身、來日本後在擁有的大豪邸中生活（為什麼兄妹間有那麼大的身分差距不明）。有點依賴的性格、經常令身邊的傭人「じいや」感到困擾。最喜歡糖果。有歌的特技、12人中相信是最能唱的。11月2日出生。
對於妹妹們的年齡、各人的「妄想」就不正式公報了。PS版中的Sister Princess中、可推測為咲耶是中學畢業、衛是中學生、花穂是小學校高學年。 雛子沒相關的判明點、『動畫・Sister♥Princess』是幼稚園兒、PS版Sister Princess2』是9歳生日前、生日後是10歳（可以數生日蛋糕上的蠟燭）推斷千影・春歌・咲耶是最年長組、亞里亞・雛子是最年少組一般都這樣分別。有插圖中可以確認千影用的是中學一年生用的教科書。
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